iQue? Qbeads?
生物學相關分泌蛋白和細胞因子的定量在基礎研究和藥物開發(fā)中至關重要，對于理解炎癥和腫瘤學中的 T 細胞活化和細胞信號級聯(lián)放大作用等都有極大幫助。在過去的十年里，有越來越多的研究開始關注炎癥過程和疾病狀況，而這些研究都涉及到細胞因子的測定和分析。這些研究的實施都需要從任何給定樣品中的多種生物分子中檢測、定量和區(qū)分特定或多種細胞因子的能力。目前，研究人員通過多種成熟的免疫分析技術來分析各種疾病模型和探索性研究領域中的分泌蛋白水平，如酶聯(lián)免疫吸附測定 (ELISA)、基于流式細胞術的多重分析。然而，傳統(tǒng)的蛋白分泌物測量技術存在以下弊端：
- 通量較低、費時費力，需要標記、方案優(yōu)化、長時間培養(yǎng)和重復清洗等步驟
- 需要通過離心將上清液從細胞中分離出來
- 通常每個樣品只能分析一種分析物，數(shù)據(jù)變異性增加，并會消耗大量珍貴的樣品和試劑
- 需要手動進行復雜的數(shù)據(jù)分析以生成數(shù)據(jù)
借助豐富的 iQue? Qbeads? Plexscreen 的系列試劑，研究人員可通過不同類型的微球捕獲來分析分泌蛋白，從而實現(xiàn)生物參數(shù)的多重定量?？蛻艨梢詮?50 多種分析物中選擇，定量分析人類、小鼠或大鼠的分泌蛋白，或使用 iQue? Qbead? Devscreen 試劑靈活地將自制的捕獲抗體或目標蛋白質粘附于微球上。iQue? Qbeads? 具有高度的可重現(xiàn)性，可顯著降低樣品用量（低至 2 μL）和獲得結果的時間，且完全無需手動操作和清洗步驟。用戶可以將 iQue? Qbeads? 檢測與其他 iQue? 分析試劑盒結合使用，通過簡化的無縫工作流程，對蛋白質分泌、細胞活力、標志物表達和增殖進行高通量測量。使用集成式 iQue? ForeCyt? 軟件節(jié)省寶貴的樣品和時間，獲取實時的藥理學分析結果。貼壁細胞或懸浮細胞中分泌的細胞因子和信號分子定量從未如此簡單！
關鍵優(yōu)勢
高通量分析?- 在 96 或 384 孔板中快速定量分泌蛋白，促進篩選和分析研究。
細胞因子的多重定量?-使用定制或預配置 panel 在單個樣品中分析多達 30 種分泌蛋白的濃度。
同時定量細胞因子和細胞數(shù) - 與其他 iQue? 分析試劑盒和/或抗體結合使用，聯(lián)合分析細胞功能和亞群。
最大程度地提高檢測效率?- 減少試劑成本和獲取結果的時間 - 通過簡便且免洗的方案進行分析，只需使用 2 μL 樣品。
實現(xiàn)高通量分析
在 96 或 384 孔板中快速定量分泌蛋白，完成篩選和分析研究。
圖 1.使用 384 孔板規(guī)格在最短時間內定量細胞因子分泌物。
在混合淋巴細胞反應 (MLR) 分析中，單獨接種（單供體對照組）或組合接種來自多個供體（總共 8 對供體）的 PBMC（80K/孔）。用多種濃度的抗 CTLA4 檢查點抑制劑抗體處理細胞。HeatMap 中顯示了 384 孔檢測板上的 IFNγ分泌。針對 384 孔板的高速分析用時不超過 20 分鐘。
細胞因子的多重定量
使用定制或預配置 panel 在單個樣品中分析多達 30 種分泌蛋白的濃度。
圖 2.使用 iQue? Forecyt? 軟件系統(tǒng)快速方便地分析數(shù)據(jù)。
? 將樹突細胞與編碼的 CD4+T 細胞（T 細胞與 DC 的比率為 3:1）一同接種，并用帕博利珠單抗處理細胞，在第2天和第6天使用iQue?Qbeads?人炎癥組合試劑盒進行分析。每個試劑盒都為所含分析物提供了預定義分析模板。(A) 用于根據(jù) Qbeads 獨特的熒光特征分離 Qbeads 的圈門模板。(B) 使用 Qbeads 在一個單孔中重復測量得到的多個炎性細胞因子的基線分泌情況。(C) 分泌蛋白質和細胞因子的 iQue? Forecyt? HeatMap 和濃度響應曲線有效地呈現(xiàn)出了清晰的數(shù)據(jù)趨勢。
同時定量細胞因子和細胞讀數(shù)
將 iQue? Qbeads? 與其他 iQue? 分析試劑盒和/或抗體結合使用，用于細胞功能和亞群的綜合分析。
圖 3. 分泌信號分子和細胞功能的多重定量。
??使用 Dynabeads 或 CD3-CD19 BiTE（雙特異性單鏈抗體）活化 T 細胞，除了測定同一孔內的細胞活力（使用 iQue? 細胞膜完整性分析試劑盒）外，還使用 iQue? Qbeads? Plexscreen 捕捉并分析了細胞因子的產生情況。與 Dynabeads 相比，經 BiTE 處理的 T 細胞產生的細胞因子水平較低，這與靶細胞殺傷增強相關。(A) HeatMap 顯示了隨著 T 細胞活化劑濃度的增加 TNFα 的分泌濃度變化。分別用 Dynabeads (B) 和 BiTE (C) 活化 T 細胞后，IFNγ 分泌的濃度響應曲線。使用 Dynabeads (D) 和 BiTE (E) 時的細胞活力。
最大程度地提高檢測效率
減少試劑成本和獲取結果的時間 - 只需使用 2 μL 即可，節(jié)省寶貴的樣品，無需清洗步驟。
圖 4. iQue? Qbeads? Plexscreen 分析試劑盒的工作流程。
(A) 使用 iQue? Qbeads? Plexscreen 測量分析物濃度的簡單工作流程示意圖。(B) iQue? Qbeads? assay builder 具有靈活的分析規(guī)格，可在一個單孔中分析多達 30 種分泌蛋白的濃度。(C) 準確識別 iQue? Qbeads? 和使用 iQue? Forecyt? 軟件細胞群設門表征的細胞。
訂購信息
iQue? Qbeads? PlexScreen: 人分泌蛋白
| 細胞因子 | |||
| 趨化因子 | TNF | 白介素 | |
CCL2 (MCP-1) | TNF (TNFα) | IL-1α | IL-10 |
CCL3 (MIP-1α) | sCD154（sCD40 配體） | IL-1β | IL-11 |
CCL5 (RANTES) | CD178 (Fas 配體) | IL-2 | IL-12/IL-23(p40) |
CCL11 (Eotaxin) | TNFβ (LT-α/TNFSF1) | IL-3 | IL-12(p70) |
CD14 | 90563 | IL-4 | IL-13 |
CXCL9 (MIG) | IL-5 | IL-17A | |
CXCL10 (IP-10) | IL-6 | IL-17F | |
CXCL11 (I-TAC) | IL-7 | IL-21 | |
CX3CL1 | IL-8 | IFN-α | |
IL-9 | IFN-γ | ||
受體 | 粘附分子 | 生長因子 | 酶 |
CD121a (IL-1 RI) | CD54 | 血管生成素 | 顆粒酶 ?A |
CD121b (IL-1 RII) | CD62E | Basic FGF | 顆粒酶 B |
TNFRI | CD62L | CSF2 (GM-CSF) | |
TNFRII | CD62P | CSF3 (G-CSF) | |
CD106 | VEGF | ||
iQue? Qbeads? PlexScreen: 小鼠分泌蛋白
| 細胞因子 | |||
| 趨化因子 | TNF | 白介素 | |
CCL2 (MCP-1) | TNF (TNFα) | IL-1α | IL-12/IL-23 (p40) |
CCL3 (MIP-1α) | IL-1β | IL-12(p70) | |
CCL4 (MIP-1β) | IL-2 | IL-13 | |
CCL5 (RANTES) | IL-3 | IL-17A | |
CXCL1 (KC;GROα) | IL-4 | IL-17F | |
CXCL9 (MIG) | IL-5 | IL-21 | |
IL-6 | IL-23 (p19/p40) | ||
IL-9 | IFN-γ | ||
IL-10 | |||
生長因子 | 粘附分子 | ||
CSF2 (GM-CSF) | CD62E (E-選擇素) | ||
CSF3 (G-CSF) | CD62L (L-選擇素) | ||
